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首頁-技術文章-如何使用上海分光光度計進行定量分析?

如何使用上海分光光度計進行定量分析?

  • 更新時間2023-05-09
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   上海分光光度計是一種廣泛應用于化學分析和生物學研究的儀器。它通過測量樣品和參照物的吸光度差異,來定量分析物質的濃度。下面將詳細介紹如何使用上海分光光度計進行定量分析。

 

 
  1、樣品制備準備
 
  首先需要將待測樣品制備好,保證樣品的濃度在一個較小的范圍內,通常在0.1到2.0之間。如果濃度太高,會使吸光度超過儀器的檢測范圍;如果濃度太低,會使誤差增大。
 
  2、準備空白參照
 
  為了減少誤差,在進行樣品分析之前,需要準備一個空白參照,相當于沒有待測物質的樣品。空白參照通常是已知化學成分的溶液,或者僅由溶劑組成的溶液。空白參照的吸光度將作為零點進行校準和參考。
 
  3、確定波長和機器零點
 
  選擇與待測物質輕微吸收波長相同的波長進行檢測,最好選擇在樣品吸收峰值附近的波長,以獲得最佳的測量精度。另外,在進行測量之前,還需要確定儀器的零點。
 
  4、在分光光度計中放入樣品和參照溶液
 
  通常,會在分光光度計中放置兩個試管,一個是裝有待測樣品的試管,另一個是裝有空白參照的試管。這些試管需要與儀器中的光路進行對齊。
 
  5、讀取數據和計算結果
 
  一旦樣品和空白參照均被放入儀器中,就可以開始讀取數據并計算結果。分光光度計可以自動讀取并記錄兩個試管中的吸光度值,并計算它們之間的差異,其差值就是分析物質的濃度。計算公式為A=εbc,式中A表示吸光度,ε是當物質的摩爾吸收系數,b是樣品的路徑長度(即光路長度),c是樣品溶液的濃度。
 
  在進行數據分析時,需要考慮到各種可能的誤差源,如波長漂移、噪聲、路徑長度等。為了減少誤差,應進行儀器校準和使用最佳的樣品濃度。在具體實驗操作時應嚴格按照操作規程進行,記錄所有的細節,并進行多次實驗以確定結果的準確性。

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